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题目
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2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个“融合基因”,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。下列关于该过程的叙述中,正确的是[     ]
A.可以采用两种或两种以上的限制性内切酶分别同时切割运载体和含目的基因的DNA
B.构建的基因表达载体可以让目的基因进入受体细胞而不被受体细胞内核酸酶降解
C.导人受体细胞内的“融合基因”可视为一个独立的遗传单位
D.利用该技术可以追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
答案
核心考点
试题【2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个“融合基因”,再将该融合基因转入真核】;主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
基因敲除是根据DNA***原理发展起来的一门新兴技术。通常用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,从而达到基因敲除的目的。运用基因敲除技术构建基因敲除动物模型是研究基因功能中较为普遍的一种方法,其基本原理如下图所示。
请回答下列问题:
(1)在将目的基因导人受体细胞前,需要构建一个基因表达载体。一个理想的基因表达载体,通常由启动子、终止子、目的基因和_______等四部分组成。在此过程中,所需使用的相关工具酶是________。
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常为____,基因导人该细胞时,可以采用____等方法。
(3)上述途径所获得的动物,其后代并非每一个个体都含目的基因,原因是____________。
(4)假设通过基因敲除构建了一个非球形红细胞性贫血(Ⅱ型)模型动物,该动物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺陷,使红细胞膜变化引起红细胞自溶现象,但若向该动物注射ATP后,自溶现象可明显降低。由此可表明,基因对生物性状的控制方式之一是:_______________。
(5)某实验小组向正常小鼠胚胎细胞内导入某“X基因”后,发现靶基因能正常转录形成mRNA,但细胞内却不再合成相应蛋白质,其原因最可能是_____________。
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养蚕人喜欢多养雄蚕,是因为雄蚕比雌蚕产丝量多,而消耗的桑叶又比雌蚕少。有人设想将海蜇的一种绿色荧光蛋白基因导入雌蚕体内,这样在幼虫刚从卵中孵化出时即可选出雄性幼虫来饲养,从而提高蚕丝产量。据此,请回答下列问题: (1)假定已经得到少量海蜇绿色荧光蛋白基因,并知道该基因两端的一部分核苷酸序列,则可以利用_____技术来扩增并获取该基因。该项技术中需要用到的酶是___________________。
(2)将绿色荧光蛋白基因导入雌蚕体内的基本过程是:
①.用同一种_______酶同时处理运载体和绿色荧光蛋白基因,构建基因表达载体;
②.采用______技术将基因表达载体转入到从雌蚕体内获取的一个体细胞核中,再通过细胞核____获取含有绿色荧光蛋白基因且全能性好的***细胞(相当于受精卵);
③.***细胞经过培育获得能育的在紫外线下发出绿色荧光的雌蚕。为了在家蚕的后代中能较快的区分出雌雄虫,应将绿色荧光蛋白基因导人并整合到_______染色体上(蚕的性别决定类型为zw型,即雌蚕的性染色体为zw,雄蚕的性染色体为zz)。
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下图表示叶片的光合作用强度与植物周围空气中的CO2浓度的关系,ce段是增大了光照强度后测得的曲线。请回答:
(1)影响图中曲线ab段和bc段叶片光合作用强度的要环境因素分别是_______和_______。 
(2)如在e点后再次增大光照强度,则曲线能否持续上升?_______,原因是_______。
(3)为提高农作物的产量,除提高光合作用效率外,还需提高作物的抗寒抗逆性。研究发现在某些深海鱼中存在抗冻蛋白基因afp,对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值,通过基因工程可以将抗冻蛋白基凶afp导入植物细胞从而提高抗寒能力。该基因工程的核心步骤是________,利用_______技术可以获得大量目的基因。将目的基因导入植物细胞最常采用的方法是___________。
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在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是[     ]
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将***DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
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将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。
(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是____________。
(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度?_________。
(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?________。
(4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为__________。
(5)对符合设计要求的***质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。
①.采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到_______种DNA片段。
②.采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切得到________种DNA片段。
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