题目
题型：浙江省高考真题难度：来源：
B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C．将***DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
答案
核心考点
试题【在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是[ ]A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂】；主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是____________。
(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_________。
(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？________。
(4)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为__________。
(5)对符合设计要求的***质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①．采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_______种DNA片段。
②．采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切得到________种DNA片段。
(1)进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下(光照14h，黑暗10h)饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是________。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是_________。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎________期开始的标志。
(2)如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管吸除雄核，再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞)，处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是________。
(3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由***细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于__________。
(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因。_________。
B．多个抗冻基因编码去依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的***质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有_______，作为标记基因。
(3)研究人员通常采用______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_______技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的________________。
[ ]
B．乙方法获得的基因片段和DNA分子上该基因片段长度不完全相同
C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D．乙方法需要逆转录酶参与
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