题目
题型：安徽省期中题难度：来源：
(1)Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA 有________ 个碱基对。
(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含***质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________。
②．将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。
③．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。
④．要进行***质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______________。
⑤．在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明，最初获得的多个***质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________。
(3)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_______________。
答案
(2)①．繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 ②．Ca+ ③．保证目的基因和载体的定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接) ④．标记基因 ⑤．DNA分子杂交技术 合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象
(3)蛋白质工程
核心考点
试题【降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出】；主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
(1)进行过程①时，需用______ 酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_________。
(2)进行过程e时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取_______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白质)含最减少引起的。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是___________末端，其产物长度为____________。
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有___________种不同DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成***质粒，那么应选用的限制酶是____________。在导入***质粒后，为了筛选出含***质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测，部分含有***质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是____________。
(2)①、②两过程利用了酶的 特性。
(3)若将得到的DNA片段用于构建***质粒，需要过程③的测序结果与 酶的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。
(4)如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列位基因的 。
(5)以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 (多选)
A．分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rRNA
B．用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素
C．通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位
D．将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。
B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞
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