显微镜的基本构造和使用方法

　　光学显微镜由目镜，物镜，粗准焦螺旋，细准焦螺旋，压片夹，通光孔，遮光器，转换器，反光镜，载物台，镜臂，镜筒，镜座，聚光器，光阑组成。

　　光学显微镜

　　通常皆由光学部分、照明部分和机械部分组成。无疑光学部分是最为关键的，它由目镜和物镜组成。早于1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。光学显微镜的种类很多，主要有明视野显微镜(普通光学显微镜)、暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、偏光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜。

　　电子显微镜

　　电子显微镜有与光学显微镜相似的基本结构特征，但它有着比光学显微镜高得多的对物体的放大及分辨本领，它将电子流作为一种新的光源，使物体成像。自1938年Ruska发明第一台透射电子显微镜至今，除了透射电镜本身的性能不断的提高外，还发展了其他多种类型的电镜。如扫描电镜、分析电镜、超高压电镜等。结合各种电镜样品制备技术，可对样品进行多方面的结构 或结构与功能关系的深入研究。显微镜被用来观察微小物体的图像。常用于生物、医药及微小粒子的观测。电子显微镜可把物体放大到200万倍。台式显微镜,主要是指传统式的显微镜,是纯光学放大，其放大倍率较高，成像质量较好，但一般体积较大,不便于移动,多应用于实验室内,不便外出或现场检测。

　　便携式显微镜

　　便携式显微镜,主要是近几年发展出来的数码显微镜与视频显微镜系列的延伸。和传统光学放大不同,手持式显微镜都是数码放大,其一般追求便携,小巧而精致,便于携带;且有的手持式显微镜有自己的屏幕,可脱离电脑主机独立成像,操作方便,还可集成一些数码功能,如支持拍照,录像,或图像对比,测量等功能。

　　数码液晶显微镜，最早是由博宇公司研发生产的，该显微镜保留了光学显微镜的清晰，汇集了数码显微镜的强大拓展、视频显微镜的直观显示和便携式显微镜的简洁方便等优点。

　　扫描隧道显微镜

　　扫描隧道显微镜亦称为“扫描穿隧式显微镜”、“隧道扫描显微镜”，是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质表面结构的仪器。它于1981年由格尔德·宾宁(G.Binning)及海因里希·罗雷尔(H.Rohrer)在IBM位于瑞士苏黎世的苏黎世实验室发明，两位发明者因此与恩斯特·鲁斯卡分享了1986年诺贝尔物理学奖。

　　它作为一种扫描探针显微术工具，扫描隧道显微镜可以让科学家观察和定位单个原子，它具有比它的同类原子力显微镜更加高的分辨率。此外，扫描隧道显微镜在低温下(4K)可以利用探针尖端精确操纵原子，因此它在纳米科技既是重要的测量工具又是加工工具。

　　STM使人类第一次能够实时地观察单个原子在物质表面的排列状态和与表面电子行为有关的物化性质，在表面科学、材料科学、生命科学等领域的研究中有着重大的意义和广泛的应用前景，被国际科学界公认为20世纪80年代世界十大科技成就之一。

　　显微镜的使用

　　利用自然光源镜检时，最好用朝北的光源，不宜采用直射阳光;利用人工光源时，宜用日光灯的光源。

　　镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

　　镜检时载物台不可倾斜，因为当在五套载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果。

　　镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

　　显微镜的重光为对光，接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时，光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等，均为自然光状态的物体，有大有小，色泽有深有浅，有的无色透明，而低倍、高倍接物镜转换较多，故须随着镜检时对不同标本和要求，需要随时调节焦距和光线，这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。

　　1. 对光：(1)将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。

　　(2)拨动反光镜，调节至视野最亮无阴影。反光镜有平、凹两面，光源强时用平面，较暗时用凹面，需要强光时，将聚光器提高，光圈放大;需要弱光时，将聚光器降低，或光圈适当缩小。

　　(3)将待观察的标本置载物台上，转动粗调节器使镜筒下降至接物镜接近标本。于转动粗调节器的同时，须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。

　　(4)左眼于接目镜观察，同时左手转动粗调节，使镜筒徐徐上升以调节焦距，使视野内的物象看到上时即停，再调微调节器，至标本清晰为止。

　　2. 接物镜的使用及光线的调节：

　　显微镜一般具有三个接物镜，即低倍、高倍及油镜，固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时，先使用低倍接物镜，此时，视野较大，标本较易查出，但放大倍数较小(一般放大100倍)，较小的物体不易观察其结构。高倍接物镜放大的倍数较大(一般放大400倍)，能观察微小的物体或结构。

　　寄生虫的蠕虫卵，微丝蚴，原虫的滋养体及包囊，昆虫的幼虫，均使用低、高倍镜。组织细胞内的原虫，则使用油镜。使用低、高倍镜观察，如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时，则转高倍镜观察。使用油镜观察，一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。

　　3. 低倍、高倍、油镜头的识别：

　　(1)标明放大倍数10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。

　　(2)低倍镜最短，高倍镜较长，油镜最长。

　　(3)镜头前面的镜孔低倍镜最大，高倍镜较大，油镜最小。

　　(4)油镜头上常刻有黑色环圈，或“油”字。

　　4. 低倍镜换高倍镜的使用方法：

　　(1)光线对好后，移动推进器寻找需要观察的标本。

　　(2)如标本的体积较大，不能清楚查见其构造因而不能确认时，则将标本移至视野中央，再旋转高倍接物镜于镜筒下方。

　　(3)旋转微调节器至物象清晰为止。

　　(4)调节聚光器及光圈，使视野内的物象达到最清晰的程度。

　　5. 油镜的使用方法：

　　(1)原理：使用油镜观察时，需加香柏油，因为油镜需要进入镜头的光线多，但油镜的透气孔最小，这样进入的光线就少，物体不易看清楚。同时又因自玻片透过的光线，由于介质(玻片-空气-接物镜)密度(玻片：n=1.52，空气：n=1.0)不同而发生了折射散光，因此射入镜头的光线就更少，物体更看不清楚。于是采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油，加于标本与玻片之间，使光线不通过空气，这样射入镜头的光线就较多，物象就看得清楚。

　　(2)油镜的使用：

　　a.将光线调至最强程度(聚光器提高，光圈全部开放)。

　　b.转动粗调节器使镜筒上升，滴香柏油1小滴(不要过多，不要涂开)于接物镜正下方标本上。

　　c.转动接物镜转换盘，使油镜头于镜筒下方。

　　d.俯身镜旁侧面在肉眼的观察下，转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内，轻轻接触玻片为止。

　　e.慢慢转动粗调节器，使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。

　　f.转动微调节器，使视野物象达到最清晰的程度。

　　g.左手徐徐移动推进器，并转动微调节器以观察标本。

　　h.标本观察完毕后，转动粗调节器将镜筒升起，取下标本玻片。立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。

　　6. 注意事项：

　　(1)使用显微镜之前，应熟悉显微镜的各部名称及使用方法，特别应掌握识别三种接物镜之特征。

　　(2)寄生虫学实习中所观察的标本，大多数为无色和颜色较浅，因此必须注意光线的调节。

　　(3)新鲜标本观察时，须加盖玻片，以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜，同时可使标本表面匀平，光线得以集中，有利于观察。