题目

大肠杆菌感受态转化的原理是什么?

提问时间：2021-03-16

答案

所谓的转化是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术.
在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移.如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA.细胞处于能够吸收DNA的状态称感受态,处于感受态的细胞称作感受态细胞.
转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体（Rˉ,Mˉ）,它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代.受体细胞经过一些特殊方法的处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞.进入受体细胞的DNA分子通过复制,表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状.将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子（即带有异源DNA分子的受体细胞）.