题目
从细胞中提取蛋白质的问题.
用 含GSTtag 的DNA去tansfect 细胞,然后用 West blot 检查蛋白表达 然后用 GST pulldown 去获得 表达的蛋白和与之反应的蛋白,跑胶),然后把band 切下来,用质谱仪检查.我看程序中并没有加 脱氧核糖核酸酶 去除杂质的步骤,只是用很高的速度去 spin cell lysate,然后取上清液.这样可以吗?脱氧核糖核酸等杂质会不会对结果产生影响啊?还是说它们根本进不到胶里面?
用 含GSTtag 的DNA去tansfect 细胞,然后用 West blot 检查蛋白表达 然后用 GST pulldown 去获得 表达的蛋白和与之反应的蛋白,跑胶),然后把band 切下来,用质谱仪检查.我看程序中并没有加 脱氧核糖核酸酶 去除杂质的步骤,只是用很高的速度去 spin cell lysate,然后取上清液.这样可以吗?脱氧核糖核酸等杂质会不会对结果产生影响啊?还是说它们根本进不到胶里面?
提问时间:2020-09-01
答案
带GST tag的蛋白体外分离纯化时,GST pulldown过程中,只有带GST的融合蛋白可以特异结合到柱子上,核酸等杂质都随流出液流走了,不会干扰你的实验结果.
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
奥巴马演讲不用看稿子.为什么中国领导演讲要看?
想找英语初三上学期的首字母填空练习……
英语翻译
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