题目
题型:江苏模拟题难度:来源:
方法思路:
①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。
②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:
(1)完成实验步骤中的空格:①.___________;②.___________。
(2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有__________。
(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板,_______为原料来合成端粒DNA。
(4)分析实验结果,得出实验结论:__________________________。
答案
(2)选择 标记基因
(3) RNA 4种脱氧核苷酸
(4)从结果可知PSG—AS导入肝癌细胞发挥作用后,端粒酶活性降低,细胞凋亡率升高,细胞生长受抑制,说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方式,能较好抑制肿瘤细胞
核心考点
试题【科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。方法思路:①构建干扰质粒____[插入针对】;主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
②.在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
②.第2组:_________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_______________。
(2)据系谱图可知,HbS基因位于______染色体上。Ⅱ6的基因型是_______,已知Ⅱ7也来自非洲同地区,那么Ⅱ6和Ⅱ7再生一个孩子,患镰刀形细胞贫血症的概率是_______。
(3)Ⅱ6和Ⅱ7想再生一个孩子,若孩子已出生,则可以在光学显微镜下观察其________形态,从而诊断其是否患病。若孩子尚未出生,则可以从羊水中收集少量胎儿的细胞,提取出DNA,用____________为原料在试管中复制出大量DNA,然后进行基因诊断。
(4)如下图所示,该基因突变是由于_________碱基对变成了________碱基对,这种变化会导致血红蛋白中_________个氨基酸的变化。
第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步:将ch1L基因与质粒构建形成***质粒1。
第③步:将***质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到***质粒2。
第④步:将***质粒2导入蓝藻细胞,由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同,所以能准确地与其发生同源***,产生出缺失ch1L基因的突变株。
(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶?________。PCR扩增DNA时必须加入引物,其作用是_____________。
(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中“复性”这一步骤发生的变化是________________。
(3)构建***质粒1、2时,为保证成功率,往往使用_________酶对基因和质粒进行切割,以切出相同的黏性末端,便于连接。此酶的作用是将DNA分子的___________键打开。
(4)质粒是基因工程中最常用的运载体,其化学本质是________,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
(5)导入***质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用________制成探针,检测是否导入了***基因,在培养基中加入_______________可将变异株细胞筛选出来。
①从细胞中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
B.①②③
C.②③④
D.②③
B.受体细胞是否有致病基因
C.目的基因是否转录mRNA
D.目的基因是否翻译蛋白质
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