题目
题型:0110 模拟题难度:来源:
第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步:将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步:将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到重组质粒2。
第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞,由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同,所以能准确地与其发生同源重组,产生出缺失ch1L基因的突变株。
(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶?________。PCR扩增DNA时必须加入引物,其作用是_____________。
(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中“复性”这一步骤发生的变化是________________。
(3)构建重组质粒1、2时,为保证成功率,往往使用_________酶对基因和质粒进行切割,以切出相同的黏性末端,便于连接。此酶的作用是将DNA分子的___________键打开。
(4)质粒是基因工程中最常用的运载体,其化学本质是________,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
(5)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用________制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入_______________可将变异株细胞筛选出来。
答案
(2)引物通过碱基互补与DNA模板链结合
(3)同一种DNA限制性内切酶 磷酸二酯键
(4)小型环状DNA
(5)红霉素抗性基因 红霉素
核心考点
试题【ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下:第①步:用PC】;主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
①从细胞中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
B.①②③
C.②③④
D.②③
B.受体细胞是否有致病基因
C.目的基因是否转录mRNA
D.目的基因是否翻译蛋白质
B.所有的DNA连接酶都只能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D.只要目的基因进入受体细胞就能成功地实现表达
①基因治疗是将健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,以治疗疾病
②在人工合成目的基因时,蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
③植物体细胞杂交,能克服远缘杂交不亲和的障碍,培育出的新品种一定是四倍体
④用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做为探针进行基因诊断
B.①②③
C.①②④
D.②③④
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