题目

pMD19-T载体 是什么

提问时间：2021-04-07

答案

pMD®19-T Vector是一种高效克隆PCR产物（TA Cloning）的专用载体.本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成.因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率.
由于本载体以pUC19载体为基础构建而成,所以它具有同pUC19载体相同的功能.此外,本制品中的高效连接液Solution I可以在短时间内（约30分钟）完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作.本制品中的Control Insert（500 bp）还可以用于Control反应.
本载体与pMD®18-T Vector 相比,本制品的 β-半乳糖苷酶的表达活性更高,菌落显示蓝色的时间缩短,菌落显示的蓝色更深.因此,克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选.
简而言之,就是一种可以将taq酶（注意：pfu不具备在产物两端加“A”碱基的能力）扩增的两端带有A碱基的产物连入这种载体,从而通过大肠杆菌扩增的载体,而且可以通过蓝白筛选来筛选阳性克隆,插入成功的为白,不成功为蓝.图谱可以去takara上下说明书.