题目

革兰氏染色时,初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染前,革兰氏阳性菌和氏阴性菌就分别是什么颜色?
请知道的牛人们支个招!

提问时间：2021-01-13

答案

不可以.因为革兰氏碘液（媒染剂）的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附着力,即以某种方式帮助染料固定在细胞上,使不易脱落.改变顺序可能会对效果有影响,所以最好按步骤做.
脱色后复染前,理论上革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.复染的目的就是增加无色阴性菌与背景的反差,以便区别于紫色的阳性菌
革兰氏阳性菌细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.
革兰氏阴性菌肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红复染后呈红色.
革兰氏染色步骤：
1.涂片,火焰固定
2.结晶紫1min,使菌体着上紫色
3.水洗
4.碘液1min,碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内
5.水洗
6.酒精脱色30s,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应.
7.水洗
8.番红复染1min,增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌.
9.以吸水纸吸干,油镜观察