题目
克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?
我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
提问时间:2020-07-31
答案
在设备齐全的情况下,从最初分析开始呢,需要的时间大体是:
1 分析序列,设计简并引物,送公司合成引物需要等4-5天.等的过程中提取RNA和反转录时间足够了.
2 引物合成送到后,使用制备好的脑 cDNA模板利用简并引物进行PCR,然后电泳检测,这个阶段紧凑的话1-2天.
3 如果成功克隆出了目的条带,那么就要回收,做TA克隆,然后测序.简并引物克隆出的条带貌似不太适合直接回收测序的.片段回收、与T载体连接过夜、连接后转化至感受态细菌、涂板过夜培养、单克隆小量培养、鉴定单克隆、阳性克隆送样测序、测序结果回来.这个过程需要8-10天.
4 如果测序成功了,那么继续做RACE.重复1、 2、 3步 .
一切顺利的话,30-40天的功夫吧...
1 分析序列,设计简并引物,送公司合成引物需要等4-5天.等的过程中提取RNA和反转录时间足够了.
2 引物合成送到后,使用制备好的脑 cDNA模板利用简并引物进行PCR,然后电泳检测,这个阶段紧凑的话1-2天.
3 如果成功克隆出了目的条带,那么就要回收,做TA克隆,然后测序.简并引物克隆出的条带貌似不太适合直接回收测序的.片段回收、与T载体连接过夜、连接后转化至感受态细菌、涂板过夜培养、单克隆小量培养、鉴定单克隆、阳性克隆送样测序、测序结果回来.这个过程需要8-10天.
4 如果测序成功了,那么继续做RACE.重复1、 2、 3步 .
一切顺利的话,30-40天的功夫吧...
举一反三
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
奥巴马演讲不用看稿子.为什么中国领导演讲要看?
想找英语初三上学期的首字母填空练习……
英语翻译
1,人们染上烟瘾,最终因吸烟使自己丧命.
最新试题
- 1物体a重100n 物体b重20n
- 2坚硬的反义词是().
- 3正丁醇15摄氏度的密度
- 4已知集合M和N中的元素个数相同,且M∪N={1,2,3,4},则M,N的不同构成方式有_种.
- 5父亲的眼睛多神秘啊,仿佛可以给我变出许许多多的快乐和光明 仿写
- 6有一批树苗,9棵一捆多7棵,10棵一捆多8棵,12棵一捆多10棵.这批树苗在150至200之间,一共有多少树苗?
- 7举例对人类生活和生产发生巨大影响的化学研究成果
- 8初一2011愉快的暑假答案只要数学
- 9被除数、除数、商、余数的和是89,商是7,余数是5.被除数、除数各是多少?
- 10如图所示,倾角为θ=30°、足够长的光滑平行金属导轨MN、PQ相距L1=0.4m,B1=5T的匀强磁场垂直导轨平面向上.一质量m=1.6kg的金属棒ab垂直于MN、PQ放置在导轨上,且始终与导轨接触良
热门考点