题目

利用PCR技扩增目的基因,从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为
请给出详细的解释,比如图解

提问时间：2020-07-27

答案

分两种情况,如果引物A能够与互补链完全结合,那说明引物A的序列与DNA一条单链中的某一段序列相同,这样第四轮PCR产物中含有引物A的DNA片段所占比例为100%.
另一种情况,引物A含有酶切位点或更换的碱基,不能与原始DNA完全互补,这时可以用公式（2^n-1)/2^n计算,n为循环数,第四循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例是(2^4-1)/2^4=15/16.
假设有一段DNA,可以用引物A和引物B扩增目的片段,那么
第一轮循环产物：两段DNA,分别含有引物A和引物B,原来的DNA解链后,引物A、B分别与互补链退火延伸.
第二轮循环产物：4段DNA,仅有1段没有引物A.第一轮循环产物中含有引物A的DNA,扩增为2后均含有引物A,产物中含有引物B的DNA,类似起始的DNA,扩增为2后,一段含有A,即与含有引物B的单链互补退火后延伸的产物,而引物B与另一单链退火延伸,所以没有引物A.以下类似.
第三轮循环产物：8段DNA,仅有1段没有引物A,此时真正出现要扩增的目的片段.
第四轮循环产物：16段DNA,仅有1段没有引物A,从此轮开始,目的片段以指数形式扩增.
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第n轮循环产物：2^n段DNA,仅有1段没有引物A.
图解没有画好,自己在纸上比划一下吧,其实不难,希望有所帮助.