题目

题型：同步题难度：来源：

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选***质粒示意图。
据图回答下列问题：
(1)作为受体大肠杆菌应________，以方便筛选已导入***质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入________等物质，用以筛选导入了***质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入***质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．________________________________________。
②．________________________________________。

答案

(1)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)    在试管Ⅰ中制备好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素
(3)①．如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体(或说明***质粒没导入受体大肠杆菌)
②．如果长出白色菌落，说明***质粒已导入受体大肠杆菌