题目

题型：同步题难度：来源：

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_______________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建***质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________。
(5)为了获取***质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_______酶。
(6)***质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_________________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将***质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_____________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

答案

(1)0、2
(2)高
(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质