题目

为什么要构建基因文库?直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗?

提问时间：2020-12-27

答案

基因文库技术分离目的基因 所谓文库(1ibrary)是指一种全体的集合.基因文库(gene library)则是指某一生物类型全部基因的集合.这种集合是以***体形式出现.某生物DNA片段群体与载体分子***,***后转化宿主细胞,转化细胞在选择培养基上生长出的单个菌落(或噬菌斑)(或成活细胞)即为一个DNA片段的克隆.全部DNA片段克隆的集合体即为该生物的基因文库. 构建基因文库的意义不只是使生物的遗传信息以稳定的***体形式贮存起来,更重要的是它是分离克隆目的基因的主要途径.对于复杂的染色体DNA分子来说,单个基因所占比例十分微小,要想从庞大的基因组中将其分离出来,一般需要先进行扩增,所以需要构建基因文库.在很多情况下目的基因的分离都离不开基因文库.此外基因文库也是复杂基因组作图的重要依据.基因文库构建包括以下基本程序： ① DNA提取及片段化,或是cDNA的合成. ② 载体的选择及制备. ③ DNA片段或cDNA与载体连接. ④ ***体转化宿主细胞. ⑤ 转化细胞的筛选.当获得了含***体的宿主细胞时,即完成了基因的克隆.基因的克隆只是分离基因的基础,基因克隆后还要对克隆的基因进行分离,即利用各种手段把目的基因从文库中分离出来.分离出目的基因还必须对其进行必要的检测与分析：如进行序列测定,体外转录及翻译、功能互补实验等.通过这些实验确定出基因的结构及功能.到这时才能算分离到了目的基因.所以,基因的克隆、克隆基因的分离、分离基因的鉴定是利用基因文库技术分离目的基因的主要内容