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题目
[本科生实验]从酵母中提取RNA的试验中,加碱沸水浴后为什么需要调pH至弱酸性?
具体实验步骤(来自实验指导):
称5g干酵母粉置于100ml烧杯中,加入40ml0.2%NaOH溶液,沸水浴上加热30min,经常搅拌.
然后加入数滴乙酸溶液使提取液呈酸性(石蕊试纸检查),3000r/min离心15min.取上清液,加入10ml酸性乙醇,边加边搅动.加毕,静置,待RNA沉淀完全后,离心.
滤渣先用乙醇洗两次,每次用10ml.再用无水乙醇洗两次,每次10ml,洗涤时间可用细玻璃棒小心搅动沉淀.最后用布氏漏斗抽滤,沉淀在空气中干燥.称量所得RNA粗品的重量,
个人推测可能原因:
1.pH5~6为大多数氨基酸的等电点(除苏氨酸、赖氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸外都在6附近吧),调pH可以沉淀原有的和碱性条件下水解少量蛋白质产生的氨基酸
2.碱性水浴条件下RNA水解为寡聚核苷酸而DNA不水解,调pH为了沉淀DNA(参考生物化学教材上关于稀碱法分离RNA的说法,但实验条件有所不同)
3.为了防止RNA过量水解成小分子而难以在乙醇中沉淀析出(参考生物化学关于RNA化学性质的说法)
问:
真正的目的是什么样的?我的推测正确么?

提问时间:2020-11-08

答案
调PH至弱酸主要是为了达到蛋白质的等电点来沉淀蛋白质,然后离心去除蛋白后,还要进一步加酸性乙醇是为了达到rna的等电点(ph约为2)来沉淀rna
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
奥巴马演讲不用看稿子.为什么中国领导演讲要看?
想找英语初三上学期的首字母填空练习……
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