题目

folin酚试剂法确定最大吸收波长意义 （生化试验 蛋白质的含量测定）

提问时间：2020-10-31

答案

Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理,所用的试剂是由两部分组成的.第一部分相当于双缩脲试剂,第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液).因此,反应的程序也是分两步进行的.第一步相当于双缩脲反应,在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物；第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物 (呈蓝色反应).由于蛋白质中含有带酚羟基的酪氨酸,故有此呈色反应.而且溶液颜色的深浅与蛋白质的含量成正比关系.此法也适用于测定酪氨酸和色氨酸的含量.本法可测定范围是25—250μg蛋白质