题目

题型：上海期末题难度：来源：

回答下列关于基因工程的问题下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

(1)若对图2中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性如何变化，为什么？_____________。
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoRⅠ同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止__________。
(3)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入__________酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。
(4)图1过程①可采用的操作方法是____________，过程②可采用的生物技术是_____________。过程③可采用的生物技术是________________。
(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是___________________。

答案

(1)SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高
(2)只使用EcoRⅠ，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。
(3)DNA连接酶        筛选
(4)显微注射       细胞培养        胚胎移植技术
(5)DNA转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质