题目

题型：专项题难度：来源：

人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大，通常从人血液中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致步骤如下：
Ⅰ．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．将人血清白蛋白基因导入受精卵，形成***细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激***细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。请回答下列问题：(1)一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞数量往往不足，请列举两种可以获得更多卵母细胞的方法。_____________________。
(2)步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行____________处理。
(3)步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵中采用最多的方法是____________。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件***在一起，这一步骤属于基因工程“四步曲”中的____________，此步骤的目的是____________，其中血清白蛋白基因与调控组件结合时必须用到限制性核酸内切酶和____________酶。
(4)步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加____________和血清。
(5)步骤Ⅳ中，应选择性别为_____________的奶牛胚胎进行移植。请列举一种人工控制或筛选胚胎性别的方法。_____________。

答案

(1)①．用促性腺激素处理良种母牛使其超数排卵；②．从屠宰场中已屠宰的母牛的卵巢中采集、培养
(2)获能
(3)显微注射法       基因表达载体的构建      使人血清白蛋白基因能够在奶牛乳腺细胞中稳定存在，同时能够表达和发挥作用，并可遗传给下一代     DNA连接
(4)激素
(5)雌性
①．X精子与Y精子分离技术(选择X精子进行体外受精)；
②．显微镜镜检法（利用显微镜观察胚胎细胞性染色体确定胚胎性别）；
③．SRY-PCR胚胎的性别鉴定技术[利用SRY基因(Y染色体上的性别决定基因)作为探针，对胚胎细胞的DNA进行检测](任答一种即可)