百科
酶活力测定的一般原理和方法
实验目的
(1)初步学会探索温度和pH对酶活性的影响的方法。
(2)探索淀粉酶在不同温度和pH下催化淀粉水解的情况。
实验原理
(1)淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
(2)淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:市售a-淀粉酶的最适温度约60℃
方法步骤
序号 | 加入试剂或处理方法 | 试管 | |||||
A | B | C | a | b | c | ||
1 | 可溶性淀粉溶液 | 2mL | 2mL | 2mL | / | / | / |
新鲜淀粉酶溶液 | / | / | / | 1mL | 1mL | 1mL | |
2 | 保温5min | 60℃ | 100℃ | 0℃ | 60℃ | 100℃ | 0℃ |
3 | 将a液加入到A试管, | ||||||
4 | 保温5min | ||||||
5 | 滴入碘液,摇匀 | 60℃ | 100℃ | 0℃ | |||
6 | 观察现象并记录 |
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(3)纯化蛋白质常用的方法有_______、_______等。
(4)研究表明,不同来源的纤维素酶,虽然酶的浓度相同,但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,其可能的原因是_____________。
(5)在生产实践中,纤维素酶还可用于解决能源问题,具体的用途为______________。下列关于酶工程的叙述,正确的是 [ ] A.酶的分离提纯要依次经过过滤、层析、沉淀、提纯等步骤
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